O melanoma cutâneo (MC) é o tumor mais agressivo de pele. O sucesso da imunoterapia em pacientes com MC indica que o sistema imune tem papel fundamental no desenvolvimento tumoral. O cytotoxic T lymphocyte-associated antigen-4 (CTLA-4) inibe a ativação dos linfócitos T por meio da sua ligação com proteínas de superfície da família B7 em células apresentadoras de antígeno. O CTLA-4 pode ser identificado também em melanócitos anormais, permitindo a evasão do sistema imune. O CTLA-4 é codificado pelo gene polimórfico CTLA-4. Os objetivos do estudo foram verificar se as variantes de nucleotídeo único (SNVs) no gene CTLA-4, c.-1765C>T, c.-1478G>A, c.-1577G>A e c.-1661A>G influenciam o risco, as manifestações clínicas dos pacientes e biológicas do tumor e a sobrevida dos pacientes com MC, bem como suas consequências funcionais. Foram avaliados 432 pacientes com MC e 504 controles (doadores de sangue). Os genótipos das SNVs do CTLA-4 foram identificados por meio da reação em cadeia da polimerase em tempo real (RT-PCR). As expressões do CTLA-4 com a SNV de maior interesse (SNV com resultados mais significativos em risco e sobrevida) em indivíduos com genótipos distintos das SNVs foram avaliadas por PCR quantitativo (qPCR) e pelo ensaio da luciferase. Análises de ciclo celular, proliferação, apoptose/necrose e migração foram realizadas em linhagens celulares SK-MEL-28 e A-375 modificadas para apresentar os genótipos homozigotos ancestrail ou variante da SNV de maior interesse pela técnica de Clusters of Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats (CRISPR). O significado estatístico entre grupos foi calculado pelo teste de Fisher ou qui-quadrado e pela regressão logística. As comparações entre expressões gênicas e análises dos ensaios celulares foram realizadas por meio dos testes-t e ANOVA ou teste de Mann-Whitney e Kruskal-Wallis. As sobrevidas foram avaliadas pelos testes de Kaplan Meier e log-rank e por análises de Cox. Os indivíduos com o genótipo AA da CTLA-4 c.-1577A>G e com o genótipo combinado AA + AA das SNVs CTLA-4 c.-1577A>G e c.-1478G>A estiveram sob riscos 1,60 e 3,12 vezes maiores de desenvolver MC, respectivamente. O genótipo CTLA-4 c.-1577AA foi associado com menor sobrevida livre de eventos (SLE) com 1,80 vezes mais chances de recidiva ou progressão de MC, a maior expressão do gene, maior proliferação, menor apoptose e maior migração de células quando comparado ao genótipo CTLA-4 c.-1577GG. Os resultados obtidos poderão contribuir para o entendimento da fisiopatologia do MC e para identificar indivíduos com alto risco de ocorrência do tumor e pacientes com prognóstico desfavorável.
